Фармакология и применение диацетофенонилселенида в свиноводстве

На правах рукописи

Фроловичев Александр Сергеевич

Фармакология и применение диацетофенонилселенида

в свиноводстве

Специальность: 06.02.03 -ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Краснодар 2013

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук

Научный консультант:Трошин Андрей Николаевич,

кандидат ветеринарных наук, доцент,

заместитель директора по науке

Краснодарского научно-исследовательского

ветеринарного института

Научный консультант:Родионова Тамара Николаевна,

доктор биологических наук, профессор

кафедры терапии, акушерства и

фармакологии

Киреев Иван Валентинович

кандидат ветеринарных наук, доцент

кафедры терапии и фармакологии

Ведущая организация: Государственное научное учреждение Северо-кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии

Защита состоится 24 октября 2013 года в 12 -00часов на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке при ФГБОУ ВПО «Кубанского государственного аграрного университета» (350044, г. Краснодар, ул. Калинина 13).

Автореферат размещен на официальном сайте ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ» — HYPERLINK «http://kubsau.ru» http://kubsau.ru и сайте ВАК РФ – HYPERLINK «http://vak2.ed.gov.ru» http://vak2.ed.gov.ru

Автореферат разослан « » _________ 2013 года.

Ученый секретарь

диссертационного советаРодин И.А.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В России встала острая проблема в правильном ведении сельского хозяйства, резко за последние годы сократилось поголовье сельскохозяйственных животных некоторые хозяйства стали нерентабельными и неконкурентно способными.

Основной причиной резкого снижения поголовья сельскохозяйственных животных является ухудшение кормовой базы по стране. Недостаток кормов сбалансированных по питательным веществам ведёт к снижению продуктивности с/х животных.

Нарушение в количественном и качественном отношении кормовой базы приводит к снижению поступления в организм микроэлементов, выполняющих в организме важные биологические функции (Георгиевссий В.И., Анненков П.Т., СамохинВ.Т.,1997).

Одним из наиболее дефицитным микроэлементом является селен, обеспечивающий активность многих окислительно-восстановительных ферментов, витаминов, а также влияющий на функциональное состояние защитной антиоксидантной системы организма (М.И. Рецкий, 1996). Его недостаток проявляется в виде беломышечной болезни, токсической дистрофии печени, экссудативного диатеза и других заболеваний. (Г. Абдуллаев,1974). Для восполнения в организме селена были созданы органические селено содержащие препараты в т.ч. диацетофенонилселенид. Препарат в своем составе содержит 25% органически связанного селена. Препараты разрешены к использованию в ветеринарии и применению в животноводстве в качестве кормовой добавки, однако многие стороны данного препарата ещё до конца не изучены. Так не установлены показания и параметры применения препарата в свиноводстве, так не определены многие стороны его токсикологических, фармакологических свойств.

Цель и задачи исследований.

Целью данной работы являлось исследование биологической обеспеченности организмов свиней селеном, диагностика скрытых форм селеновой недостаточности исследование влияние селеноорганического и неорганического препарата на физиологическое состояние свиней в период беременности и в период доращивания их потомства.

Исходя из этого нами были поставлены следующие задачи.

1. Изучить естественный статус организма свиней по обеспечению их селеном.

2. Изучить основные фармакологические и токсикологические свойства препарата.

3. Исследовать влияние диацетофенонилселенида на физиологическое состояние организма свиней при пероральном введении препаратов при скрытой форме гипоселенового элементоза

4. Изучить влияние на физиологическое состояние организма и’прирост живой массы поросят при пероральном введении препарата.

Научная новизна исследований.

Впервые изучена биологическая обеспеченность организма, свиней породы крупная белая, эссенциальным микроэлементом селеном в хозяйстве ЗАО «Чернавское» Вольского района Саратовской области. У обследованных животных выявлена скрытая форма гипоселенового элементоза. Изучено влияние доз селеноорганических препаратов при пероральном путях введения на морфологические, биохимические показатели крови свиноматок, их состояние антиоксидантиоксидантной системы, физиологическое состояние, и прирост живой массы взрослым животных и их потомства. Установлено, что применение препарата повышает активность антиоксидантной системы защиты организма, нормализует морфологические и биохимические показатели крови в пределах нормы. Повышается в ходе применения селенистых препаратов продуктивность свиноматок в период супоросности и как следствие рождается здоровое потомство и быстрее набираются привесы у приплода, высокая степень сохранности молодняка в подсосный период.

Теоретическая и практическая ценность работы.

Прошедшие опыты позволили удостовериться в необходимой потребности селена свиньями в период супоросности и в период выращивания поросят. Были предложены и обоснованы показатели и критерии для диагностики скрытой формы се тоновой недостаточности (концентрация селена в сыворотке крови, показатели АсАт, АлАт, общего белка, гематологические показатели.) Для профилактики селеновой недостаточности у свиноматок породы крупная белая и их потомства в дозе перорально 2 мг/кг сухого вещества корма во время супоросности свиноматок и в подсосный период поросят до 2-х месячного возраста.

Основные положения выносимые на защиту.

Выявлен низкий селеновый статус организма крупно-белой породы свиней и их потомства, соответствующий скрытой форме гипоселенового элементоза.

Пероральное введение препарата в дозе 2 мг вещества на 1 кг сухого вещества корма свиноматкам стабилизирует селеновый статус поросят и свиноматок при применение селенистых препаратов.

Пероральное введение снижает перекисное окисление липидов, активизирует антиоксидантную систему защиты организма, повышает продуктивность животных.

Биологическая обеспеченность организма свиней оценивалась клинически по содержанию элемента в сыворотке крови, биохимии крови, показателям периферической крови, профилактической и лечебной эффективности при селенодефицитных состояниях.

Апробация результатов. Основные положения диссертации были представлены и обсуждены на международной конференции молодых ученых в 2306г., в г. Белгороде; на конференции молодых ученых СГАУ им. Н.И.Вавилова в 2004-2006 годы., в г.Саратове; Журнал «Человек и лекарство» 2008г.,г.Москва;

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 5печатных работ из 2 в изданиях входящих в перечень ВАК.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 149 листах, содержит 57 таблиц. Список литературы включает 158 источников, из них 41 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Научно-хозяйственные и физиологические опыты проводились в ЗАО «Чернавское» Вольского района Саратовской области на супоросных свиноматках породы крупная белая и поросятах сосунах.

Подопытные группы подбирались по принципу аналогов с учетом возраста, породы, живой массы и физиологического состояния. До начала эксперимента проводились клинические исследования всех подопытных животных. Показатели микроклимата отвечали зоогигиеническим требованиям и были идентичны для всех опытных и контрольных групп животных. Кормление осуществляли кормами заготовленными в хозяйстве. Состав суточного рациона свиноматок состоял из следующих кормов.

Оценку химического состава кормов проводили в химической лаборатории кафедры кормления с/х животных, по общепринятой методикам, утвержденным ВИЖ, ВАСХНИЛ (1996).

Фармакологическое действие препарата диацетофенонилселенида устанавливали по их влиянию на показатели белкового, липидного и углеводного обменов, состояние органов кроветворения – по биохимическим показателям, морфологическому составу крови. Учитывали интенсивность роста животных. Взвешивание их проводили до введение препаратов и в динамике через каждые 15 дней. На основание полученных данных рассчитывали абсолютный, среднесуточный и относительный прирост живой массы.

Морфологический и биохимический анализ крови подопытных животных проводился также в биохимической лаборатории кафедры. Подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов проводили по общепринятым методам к камере Горяева. Концентрацию гемоглобина в сыворотке крови определяли с помощью гемометра типа ГС-3.

Активность аспаргиновой и аланиновой трансаминаз (АсАт;АлАт) определяли методом Райтмана-Френкеля( 1978). Принцип метода: В результате переаминированил, происходящего под действием АсАт и АлАт,

образуются щавелевоуксусная и пировиноградная кислоты, которые с 2,4-динитрофенилгидрозином в щелочной cpeдe образуют окрашенные гидразоны пировиноградной и щавелевоуксусной кислот.

При определении α-амилазы использовали амилокластический метод со стойким крахмальным субстратом (метол Каравея 1980). Принцип метода заключается в том, что α-амилаза гидролизует расщепление крахмала с образованием конечных продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Об активности α-амилазы судят по уменьшению интенсивности окраски.

Для определения концентрации общего белка в сыворотке крови использовали биуретовую реакцию по методу Лоури 1951.

Принцип метода заключается в том, что в щелочной среде белки реагируют с сульфатом меди с образованием соединения, окрашенного в фиолетовый цвет.

Содержание альбуминов определяли по концентрации альбумина (по реакции с бромклезоловым зелёным). Принцип метода заключается в том, что альбумины способны взаимодействовать в слабо-кислой среде в присутствии детергента с бромклезоловым зелёным с образованием соединения синего цвета. Степень интенсивности окраски раствора пропорциональна содержанию альбумина.

Тимоловая проба (унифицированный метод). Его принцип заключается в том, что при взаимодействии сыворотки крови с тимолово-вероналовым буфером появляется помутнение вследствие образования глобулин-тимол-липидных комплексов.

Определение содержание мочевины в сыворотке крови определяли уреазным методом по реакции с фенол-гипохлоридом. Его принцип заключается в том, что мочевина под действием уреазы разлагается на углекислый газ и аммиак. Аммиак определяют колометрически по образованию продуктов синюшного цвета (индофенолов) с гитгохлоритом натрия и фенола.

Определение аскорбиновой кислоты определяли по Гилъмансу 1973г. Принцип метода заключается в том, что методика основана на реакции восстановления 2,6-дихлорфенолиндафенола в кислой среде в присутствии аскорбиновой кислоты в лейкоформуле. При этом аскорбиновая кислота окисляется в дигидроаскорбиновую. О завершении окислительно-восстановительного процесса свидетельствует появление розового окрашивания титруемого раствора после прибавления очередной капли 2,6-дихлорменолиндафенола.

Количество ретинола (витамине А) и каратиноидов в сыворотке крови по Бессей в модификации А.А. Анисимовой. Принцип методы заключается том что определение витамина А и каротиноидов основано на иx гидролизе в щелочном спиртовом растворе с последующей экстракцией смесью органических растворителей.

Содержание холестерина определял унифицированным методом па реакции с хлорным железом (метод Златкис-Зака). Принцип метода основан на том, что свободный или связанный холестерин, содержащийся в плазме или сыворотке крови, окисляется железом в присутствии уксусной, серной и ортофосфорной кислот с образованием продуктов, окрашенных в красно-фиолетовый цвет, Ортофосфорная кислота повышает стойкость реактива, содержащего хлорное железо.

Определение липопротеидов в сыворотке крови методом электрофореза на бумаге (по Свану, 1953; Л.К. Бауман, 1961 в видоизменении В.Г. Колб, 1970). Принцип метода сводится к электрофоретическому разделению на фракции предварительно окрашенных суданом черным липопротеидов сыворотки крови с последующим определением оптической плотности извлеченной краски и вычислением процентного соотношения между α- и β-липопротеидами.

Определение фагоцитарной реакции нейтрофильных лейкоцитов крови (Васильев Н.В., Одинцов Ю.Н., Федоров Ю.Е., 1972). Принцип метода основан на количественном определении поглощенных и переваренных нейтрофилами микроорганизмов при совместной инкубации исследуемой крови с микробной тест-культурой.

Количество триглицеридов определяется унифицированным методом по реакции с ацетилацетоном после экстракция смесью гептана и изопропилового спирта. Триглицериды экстрагируются смесью гептана и изопропилового спирта, в которую, переходят только неполярные липиды, более полярные фосфолипиды остаются в водной фазе. Триглицериды гидролизуются щелочью. Глицерин окисляется йодной кислотой до формальдегида, который определяется по цветной реакции с ацетилацетоном.

Количество иммуноглобулинов определял методом радиальной иммунодиффузии (G.Mancini et, 1965). Принцип метода основан на иммунологическом феномене преципитации. Антигены (в данном случае — иммуноглобулины исследуемой сыворотки) диффундируют в геле, образуя прочные оседлые локализованные в ячейках геля иммунные комплексы с антителами (моноспецифическая сыворотка против иммуноглобулинов), содержащимися в геле. Исследуемая сыворотка, внесенная в лунки, диффундирует радиально с образованием колец преципитации. По диаметру кольца преципитации в сравнении с контролем определяют концентрацию антигена.

Анализ содержания селена в крови и мышечной ткани и кормах животных проводили на кафедре физиологии и фармакологии Саратовского государственного аграрного университета им Н.И.Вавилова в лаборатории биохимического анализа флуорометрическим методом. Принцип метода основан на способности 3,3 диаминобензидина избирательно образовывать комплексное соединение с четырехвалентным селеном, находящимся в форме селен-иона SeO. Разложение образца (корм, ткань) проводится смесью азотной и хлорной кислот, а перевод шестивалентного селена в четырёхвалентный нагреванием раствора с концентрированной соляной кислотой. Четырехвалентный селен взаимодействует с 3,3-ДАН, при этом образуется комплексное соединение 4,5-бензониазоселенол, которое флуорисцирет под действием ультрофиолетовых лучей. Соединение экстрагируется из кислых растворов циклогексаном. Интенсивность флуоресценции определяли на флуорометре ЭФ-3м чувствительность метода 0,0002 мкг/г/мл.

Экспериментальные данные были подвергнуты биометрической обработке с помощью программного обеспечения на компьютере. Критерий достоверности определяли по таблице Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Получение и токсические свойства диацетофенонилселенида

Актуальной остается проблема разработки и внедрения новых препаратов органического селена, обладающих высокой биологической активностью. К таким селенистым соединениям относится диацетофенонил селенид.

Был изучен естественный статус почвы Вольского района Саратовской области. Для выявления уровня обеспеченности животных селеном было исследовано его содержание в почвах в течение 2006-2008 гг. Усредненные образцы почв брались с одних и тех же участков почвенного горизонта глубиной 20 см.

Больше всего селена обнаружилось в июле 0,06±0,007 мг/кг, наименьшее его количество было в октябре 0,021±0,002 мг/кг. Средняя концентрация селена в почве за 2006/2007 гг. составила 0,037±0,002 мг/кг.

Результаты исследований свидетельствуют, что в исследуемых образцах растений содержание селена ниже оптимального, уровень которого составляет 0,05 мг/кг. Содержание селена в растениях колеблется от 0,011±0,002 до 0,034 ±0,007 мг/кг сухого вещества. Анализируя полученные результаты, можно утверждать, что в суглинистых почвах Вольского района и растениях произрастающих на них, количество селена значительно меньше, чем в суглинистых почвах.

О наличии у свиней селеновой недостаточности свидетельствуют показатели, характеризующие состояние гемопоэза по количеству эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов в периферической крови. Количественные величины этих показателей находятся на уровне нижних границ физиологической нормы (эритроциты 4,3-4,5·1012/л, гемоглобин 9-9,9г%, лейкоциты 6-6,1·10 9/л).

Характерными признаками скрытой формы гипоселенового элементоза является низкая концентрация селена в сыворотке крови свиней. У свиней она составляет менее 0,08 мкг/мл, пониженный уровень общего белка (ниже среднего физиологического уровня) и глобулинов, снижения гемопоэза до нижних границ физиологической нормы, понижение активности ферментативного звена антиоксидантной системы защиты, повышенный уровень свободнорадикальных процессов и перекисного окисления липидов.

Свиноматкам крупно-белой породы препарат задавали перорально в дозе 2мг на 1кг корма с первых дней супоростности через каждые 10 дней. Свиньям контрольной группы препарата селена не назначали.

Полученные данные свидетельствуют о том, что диацетофенонилселенид в изученных дозах повышает уровень селена в сыворотке крови животных и нормализует биологическую обеспеченность организма свиней селеном.

Назначение диацетофенонилселенида животным не проявляет выраженных токсических эффектов у животных, не влияет отрицательно на качество мяса и других продуктов убоя.

3.2. Фармакологические свойства препарата

Исследования крови свидетельствуют о нормализующем влиянии препарата на обмен веществ у свиней и прежде всего системы антиоксидантной защиты организма и содержания минеральных веществ: меди, цинка, железа.

Испытаниями установлено, что продолжительность супоростности у свиноматок первой и второй опытных, а также контрольной групп существенно не различалась и составила соответственно 114,3±0,19 и 114,3±0,18 дней. На одну свиноматку получено 9,1±0,38, 9,6±0,38 живых и 1,0±0,17, 1,5±0,19 мертворожденных поросят. При этом слаборазвитых поросят оказалось соответственно 1,4±0,16, 1,9±0,18.

Препарат оказывает выраженное нормализующее влияние на обмен веществ у свиней, что способствует снижению количества мертворожденных и слаборазвитых поросят, уменьшению заболеваемости свиноматок послеродовыми болезнями. (табл. 1)

Таблица 1

Показатели продуктивности свиноматок

Показатели

Группа

контроль

опыт

Опоросилось свиноматок, гол

11

11

Родилось поросят, гол.

118

129

Количество поросят на 1 свиноматку, гол.

10,73±1,9

11,73±1,63

Масса тела родившихся поросят на 1 свиноматку, кг

14,16

16,07

Масса тела одного поросенка при рождении, кг

1,32±0,08

1,37±0,075

Оставлено поросят на подсосе, гол

118

129

Заболело поросят с рождения до отъема, гол. (гипотрофия, ж.-к. болезни)

53

22

Заболело поросят с рождения до отъема в % к народившимся

44,9

17,05

Пало, голов

14

9

Сохранность, %

88,13

93,02

Живая масса на 30 день, кг

6,96±1,42

7,67±1,37

Общий прирост 1 поросенка, кг

5,64

6,3

Среднесуточный прирост, г

188

210

Среднесуточный прирост к контролю, %

100

111,7

В ходе эксперимента были выявлены контрольные поросята с выраженной клинической картины поражения печени, проявления которой заключались в отсавании в росте и развитии от своих сверстников (гипотрофики), отсутствии аппетита, общей слабости, понижения тонуса мускулатуры, шаткостью походки, сопорозным состоянием, взъерошенностью щетины и желтушностью видимых слизистых оболочек. В углах глаз наблюдали скопление экссудата в виде засохших желто-серых корочек. У многих поросят (~70% от исследованных) наблюдали дистрофические изменения эпидермиса, характеризующиеся множественными некротическими очагами кожи ушей, головы, спины в виде отдельных пятен (3 x 5 см) или диффузной сыпи серо-желтого цвета.

В ходе исследования их крови было установлено, что в среднем у клинически больных поросят наблюдалось повышенная активность ферментов АСТ и АЛТ (на 54,5 и 11,8 % соответственно) и значительное увеличение концентрации общего билирубина (в 19 раз), в основном, за счет непрямого. Наблюдали снижение концентрации общего белка (на 31,3%), при относительном увеличении y-глобулиновой фракции (~ в 2 раза). Значительнее всего снижалась а-глобулиновая фракция–в 1,86 раза в сравнение со средним показателем у клинически здоровых животных. Концентрация глюкозы в крови больных поросят была также ниже, чем у клинически здоровых с дефицитом белков, происходили изменения и в составе периферической крови – лейкоцитоз, нормохромная анемия, с присутствием большого количества патологических форм эритроцитов (полихроматофилия, анизоцитоз, пойкилоцитоз, остатки ядер в клетках), в лейкоформуле – простой регенеративный сдвиг ядра влево при полном отсутствии базофилов, юных нейтрофилов, моноцитов, эозинопении и лимфоцитопении. Скорость оседания эритроцитов достигла 25мм/ч , что в ~ 4,6 раза выше показателя контрольной группы. Гематокритное число также оказалось низким — ниже, чем у клинически здоровых поросят на 19,66%.

У трех животных была исследована проба мочи качественными реакциями. Было обнаружено наличие в моче кетонов, белка, билирубина, желчных кислот и желчных пигментов.

После предварительных исследований был проведен экспериментальный убой 5 клинически больных и 5 клинически здоровых поросят с отбором ткани печени для гистологического исследования. Проведено вскрытие 5 павших поросят с признаками поражения печени.

Печень павших и вынужденно убитых животных (9 голов) несколько увеличена в размерах, края тупые. У 4 поросят рисунок наружной поверхности пестрый у 3-мозаичный. Видны участки (преимущественно по краю печени) неправильной формы серого, бело-желтоватого и охряного цвета вследствие жировой декомпозиции и некрозов. С разреза соскоб обильный, мажущей консистенции, серо- или красно-коричневого цвета. При гистологическом исследовании обнаружено нарушение балочной структуры (дискомплексация печеночных балок), дистрофические и некротические изменения гепатоцитов (белковая, зернистая, и частично-гидропическая дистрофия), гиперемия сосудов, пролиферация их клеток, слущивание, местами-пролиферация эпителиальных клеток желчных протоков.

В сравнении с показателями не леченых поросят, под действием селенсодержащего препарата и фосфолипидов происходило снижение активности ферментов АСТ-АЛТ-на 14.33 и 28,44% соответственно уменьшение концентрации билирубинов, (общий- в 2,4 раза и 1,8 раза, прямой- в 1,3 раза и 1,5 раза, непрямой- в 2,8 раза и 1,5 раза соответственно), снижалась концентрация гамма-глобулинов при увеличении содержания общего белка. В сыворотке повышалась концентрация глюкозы при полном исчезновении ее из мочи наряду с кетонами и производными билирубина. Было обнаружено уменьшение количества гамма-глобулинов относительно других фракций белка в 1,6 и 1,5 раза относительно негативного контроля. Уменьшился общий дефицит эритроцитарной массы, хотя количество патологических форм эритроцитов осталось по-прежнему большим. Изменился и характер анемии -она стала гиперхромной. В лейкоформуле также произошли значительные изменения. Появились моноциты, базофилы, увеличилось содержание лимфоцитов (в основном, за счет В- при снижении Т-клеток) и снизился процент палочкоядерных нейтрофилов на фоне уменьшения общего количества лейкоцитов. Скорость оседания эритроцитов значительно уменьшилась, но не достигла значений контрольной группы.

Печень убитых животных из опытных групп в отличие от печени не леченных не была увеличена в размерах, соскоб с разреза был менее обильным, рисунок органа – хорошо выраженным, хотя во всех случаях присутствовали участки, характеризующие дистрофические процессы, как и у не леченных животных. Гистологическим исследованием были обнаружены количественные изменения, свидетельствующие о приостановке дистрофического процесса и нормализации обменных процессов в ней.

Результаты проведенного опыта показали, что поросята хорошо и без каких-либо последствий переносили введение препарата. Животные во все дни наблюдения были активными, поведением и аппетитом не отличались от поросят контрольной группы. Заболевания среди поросят всех групп не регистрировали в течение всего срока опыта. Проведенное взвешивание показало, что средняя масса животных из контрольной группы за 30 дней увеличилась на 7,29 кг, животных, которым давали препарат – на 10,08 кг. Соответственно в этих группах среднесуточный прирост составил 280,387 и 296г. Следовательно, наилучшие результаты по привесам были получены в опытной группае, где привес был на 38,2% выше, чем в контроле. У поросят второй опытной группы, которым препарат ввели в дозе 2 мг/кг веса прирост был выше от контрольной группы на 5,7%.

При изучении морфологического состава крови были зафиксированы следующие изменения. Через 15 дней после введения препарата у поросят обеих опытных групп, по сравнению с контрольной, было установлено более высокое ( на 9,4-18,8%) содержание в крови эритроцитов. Причем у поросят, обработанных 5 мг/кг оно было достоверным. Более высокое содержание эритроцитов у опытных животных наблюдалось и более высокое содержание в крови гемоглобина. Напротив, со стороны белой крови, в опытных группах в течение первых 15 дней после применения препарата, отмечено некоторое снижение количества лейкоцитов. В последующие дни содержание лейкоцитов в крови у поросят опытных и контрольных групп достоверно не отличалось между собой, и было в пределах нормы. В лейкоцитарной формуле наиболее существенные изменения происходили со стороны эозинофилов, количество которых у поросят, обработанных препаратом было достоверно более низким, чем у интактных животных и у животных первой опытной группы. В опытных группах по сравнению с контрольной среди нейтрофильных гранулоцитов отмечали тенденцию к увеличению только палочкоядерных форм. Количество сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов достоверно не отличалось между собой.

Исследование показателей, характеризующих иммунный статус поросят показало, что препарат в различных дозах неадекватно оказывает влияние на иммуннокомпетентные клетки, при введении меньшей дозы – оно более низкое, а большей – более высокое. Так, у поросят опытной группы установили повышение активности только со стороны нейтрофилов, в то время как у поросят второй опытной группы увеличилось на 3% количество Т-лимфоцитов, на 6,4% В-лимфоцитов, на 16,7% количество активных нейтрофилов и на 26,2% их переваривающая способность. Через 30 дней после введения препарата большинство иммунологических показателей не отличались между собой у животных всех групп, за исключением фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов. В опытных группах этот показатель был по-прежнему достоверно выше (на 10-12%), чем в контрольной.

При изучении некоторых биохимических показателей (табл. 4) – было установлено, что наибольшее влияние препарата оказывает на глобулиновую фракцию сыворотки крови. Причем, концентрация а- и у- глобулинов у опытных животных имела достоверную тенденцию к увеличению, а β-глобулинов к снижению. При этом количество общего белка и альбуминов у животных достоверно не отличалось между собой.

Исследуя витаминный обмен были получены следующие данные: поросята, обработанные препаратом, спустя 15 дней отличались от интактных животных более высоким (на 46,8-50%) содержанием в крови витамина D. На содержание в сыворотке крови витамина А препарат существенно не повлиял, хотя во второй опытной группе уровень ретинола на всем протяжении исследования оставался практически неизменным, в то время как в контрольной группе он снизился на 15,7%.

Профилактическое действие при послеродовых заболеваниях

Заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями после введения препарата снизилась по сравнению с контролем в 1,2 раза, в том числе метрит-мастит-агалактией – 1,5 раза и эндометритом 1,5 раза. Профилактическая эффективность препарата в сравнении с селенитом натрия оказалась выше соответственно 1,8 и 1,2 раза.

Исследования крови показали, что введение свиноматкам препарата оказало нормализующее влияние на обмен веществ. У свиноматок опытной группы выше содержание в крови эритроцитов на 14,3%, гемоглобина на 4,4%, глюкозы – на 11,5%, общих липидов – на 16,7%, гамма-глобулинов – на 12,5%, меди – на 20,7%, витамина А – на 20,6%. В то же время установлена на 27,3% меньшая активность аланинаминотрансферазы и на 17,1% ниже активность аспартатаминотрансферазы, что свидетельствует об улучшении функционального состояния печени и, прежде всего, ее белково-синтетической функции.

Применение препарата не отразилось на продолжительности супоросности, которая по группам животных составила соответственно 114,9±0,15, 114,8±0,18 дней. На одну свиноматку получено соответственно 9,79±0,13, 9,60±0,15 живых и 0,94±0,07, 1,26±0,11 мертвых поросят. Из родившихся живыми слаборазвитых поросят имелось соответственно 1,44±0,08, 1,66±0,07. Применение препарата позволило снизить мертворождаемость поросят соответственно в 1,3 раза и количество слаборазвитых в 1,2 раза. Применение препарата позволило сократить заболеваемость свиноматок послеродовыми болезнями в 1,3 раза, в том числе заболеваемость ММА – в 1,9 раза.

Применение препарата существенно не отразилось на продолжительности супоросности свиноматок, которая колебалась в пределах 114,6-115,1 дней. Препарат оказал более благотворное влияние, на внутриутробное развитие поросят. При его применении снизилась мертворождаемость поросят в 2,1 раза по сравнению с отрицательным контролем и соответственно в 1,42 раза – в сравнении с применением селенита натрия.

Исследованиями также установлено, что препарат на 30-32 день супоросности, оказывает нормализующее влияние на обмен веществ, которое проявляется снижением концентрации в крови (за 3-5 дней до опороса) недоокисленных токсических продуктов перекисного окисления липидов (малонового диальдегида на 18-56%, кетодиенов – в 1,3-2,4 раза), повышением уровня эритроцитов – на 11,1-25,5%, гемоглобина – на 6,9-12,1%, глюкозы – на 6,7-11,5%, общих липидов – на 16,7%, меди – на 6,9-20,7%, цинка – на 20,3-45,3%, железа – на 17,0-51,2%, витамина А – на 14,9-20,6%, витамина Е – на 12,5%. При этом существенно снижается активность аланин- и аспартатаминотрансфераз (соответственно на 21,3-28,6 и 20,7-37,5%). (табл. 2)

Таблица 2

Содержание продуктов перекисного окисления липидов у поросят после

введения препарата (M±m)

группы

Диеновые конъюгаты

Д/мг липидов

Кетодиены

Д/мг липидов

Малоновый

диальдегид

Д/мг липидов

опыт

0,305±0,02*

0,113±0,02*

0,29±0,01

контроль

0,51±0,04

0,216±0,04

0,36±0,02

опыт

0,50±0,01*

0,25±0,04*

0,23±0,04*

контроль

0,67±0,04

0,39±0,02

0,41±0,03

*- Р<0,05.

Исследованиями установлено, что содержание селена в крови свиноматок на 32-й день супоросности составило в среднем 4,18±0,74 мкг% и его концентрация не изменилась к концу супоросности у животных контрольной группы (4,16±0,47 мкг%). В группе животных, которым назначали селенит натрия, уровень селена в крови в конце супоросности были в 1,35 раза выше, чем в контроле и составил 5,62±0,92 мкг%. В крови свиноматок, которым препарат, содержание селена оказалось наибольшим – 6,87±1,00 мкг%, что в 1,65 раза выше, чем в контроле. (табл. 3)

Таблица 3

Содержание селена в крови после введения препаратов поросятам

Препарат

Доза препарата (по АДВ)

Содержание селена в крови (мкг%)

через 1 месяца

через 2 месяца

через 3 месяцев

препарат

5 мг/кг



Страницы: 1 | 2 | Весь текст